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Auteur: Geoffrey Morelle

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UNIVERSITÉ DE STRASBOURG
ÉCOLE DOCTORALE VIE ET SANTE
Institut de Biologie Moléculaire des Plantes, UPR 2357 CNRS

THÈSE

présentée par :

Morgane MICHAUD
soutenue le : 26 septembre 2012

pour obtenir le grade de : Docteur de l’université de Strasbourg
Discipline/ Spécialité : Aspects Moléculaires et Cellulaires de la biologie

Adressage des ARNm cytosoliques à la surface
des mitochondries végétales

THÈSE dirigée par :
Duchene Anne-Marie

Maitre de Conférences, Université de Strasbourg

RAPPORTEURS :
CORRAL-DEBRINSKI Marisol
MIREAU Hakim

Directrice de Recherche, Institut de la Vision, Paris
Directeur de Recherche, Institut Jean-Pierre Bourgin, Versailles

AUTRES MEMBRES DU JURY :
ROMBY Pascale

Directrice de Recherche, IBMC, Strasbourg

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A"ma"famille…"

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Je! tiens! tout! d’abord! à! remercier! les! membres! de! mon! jury,! Dr! Marisol! Corral9
Debrinski,! Dr.! Hakim! Mireau! et! Dr.! Pascale! Romby,! pour! avoir! accepté! de! juger! mon!
travail!de!thèse.!
!
Mes!remerciements!vont!ensuite!à!Anne9Marie.!Merci!de!m’avoir!formée!au!métier!
de! la! recherche,! merci! pour! toutes! ces! discussions! que! nous! avons! pu! avoir!
(scientifiques!ou!non…),!et!surtout,!pour!ta!patience!et!ta!disponibilité.!Je!sais!que!ça!n’a!
pas! toujours! été! facile! (et! je! pense! que! c’est! toujours! de! la! sorte! lorsque! les! résultats!
positifs!ne!sont!pas!au!rendez9vous…),!mais!on!l’a!enfin!identifié!notre!élément!cis$!!!!!
!
Un!grand!merci!également!au!labo!326!(past!and!former).!Je!tiens!à!remercier!tout!
particulièrement! Elodie! et! Laura! qui! m’ont! été! d’une! aide! technique! précieuse! ces!
derniers! mois…! Merci! à! Thalia! et! Bibi! qui! m’ont! appris! à! travailler! en! conditions!
extrêmes.!Je!remercie!également!tous!les!membres!du!futur!ex9département!mito!et!de!
l’IBMP!qui!ont!toujours!trouvé!le!temps!de!répondre!à!mes!questions.!
!
Enfin,!je!terminerais!en!remerciant!ma!famille!ainsi!que!tous!mes!amis!parce!qu’il!y!
a!aussi!une!vie!en!dehors!du!monde!très!prenant!de!la!recherche…!
!
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TABLE&DES&MATIERES&
&
ABREVIATIONS&
PREFACE&
INTRODUCTION……………………………………………………………………………………………………..1&
MATERIEL&ET&METHODES……………………………………………………………………………………86&
Chapitre&I&:&Matériel.&....................................................................................................................&86&
I.#Matériel#végétal.#...........................................................................................................................................................................#86&
II.#Souches#de#levure.#.....................................................................................................................................................................#86&
III.#Souches#bactériennes#.............................................................................................................................................................#86&
IV.#Vecteurs#........................................................................................................................................................................................#87&
V.#Anticorps.#.......................................................................................................................................................................................#89&
VI.#Oligonucléotides.#.......................................................................................................................................................................#89&
VII.#Outils#informatiques.#.............................................................................................................................................................#90&

Chapitre&II&:&Méthodes.&................................................................................................................&91&
I.#Transformation#d’organismes.#..............................................................................................................................................#91&
1.#Transformation#de#bactéries.#..........................................................................................................................................#91#
2.#Transformation#de#levure.#................................................................................................................................................#92#
3.#Transformation#de#plantes#...............................................................................................................................................#93#
II.#Techniques#relatives#à#l’ADN.#...............................................................................................................................................#95&
1.#Réaction#de#PCR.#...................................................................................................................................................................#95#
2.#Electrophorèse#sur#gel#d’agarose#non#dénaturant.#................................................................................................#96#
3.#Clonages.#...................................................................................................................................................................................#97#
4.#Mutagénèse.#............................................................................................................................................................................#99#
5.#Génotypage#de#mutants#d’insertion#ADNTT#de#plantes.#....................................................................................#100#
III.#Techniques#relatives#à#l’ARN.#...........................................................................................................................................#101&
1.#Extraction#d’ARN.#..............................................................................................................................................................#101#
2.#Dosage#des#ARN.#.................................................................................................................................................................#103#
3.#Préparation#des#ADNc.#....................................................................................................................................................#103#
4.#Electrophorèse#sur#gel#d’agarose/formaldéhyde.#...............................................................................................#104#
5.#Electrophorèse#sur#gel#de#polyacrylamide/urée.#................................................................................................#105#
6.#Northern#Blot.#.....................................................................................................................................................................#105#

#
IV.#Techniques#relatives#aux#protéines.#..............................................................................................................................#107&
1.#Extraction#de#protéines.#..................................................................................................................................................#107#
2.#Quantification#des#protéines#par#la#méthode#de#Bradford.#.............................................................................#108#
3.#Electrophorèse#en#conditions#dénaturantes#(SDSTPAGE)#................................................................................#108#
4.#Immunorévélation#de#type#par#western#blot.#.......................................................................................................#109#
V.#Extraction#de#mitochondries.#.............................................................................................................................................#110&
1.#Extraction#des#mitochondries#de#tubercules#de#pomme#de#terre.#...............................................................#110#
2.#Extraction#de#mitochondries#à#partir#de#cellules#d’A.#thaliana.#.....................................................................#111#
3.#Extraction#de#mitochondries#à#partir#de#plantules#cultivées#en#milieu#liquide.#....................................#113#
4.#Estimation#de#la#quantité#de#mitochondries#extraites.#.....................................................................................#114#
VI.#Tests#de#complémentation#de#levures.#.........................................................................................................................#114&
VII.#Test#respiration#levures.#...................................................................................................................................................#115&
1.#Préparation#des#levures#..................................................................................................................................................#115#
2.#Mesure#de#respiration.#....................................................................................................................................................#115#
VIII.#Tests#de#germination.#.......................................................................................................................................................#116&
IX.#Observations#en#microscopie#confocale.#.....................................................................................................................#116#

#
RESULTATS&
&
1ère& partie&:& Mise& en& évidence& du& processus& d’adressage& d’ARNm& à& la& surface& des&
mitochondries&végétales&et&étude&de&l’ampleur&du&phénomène………………………...117&
Chapitre&I&:&Mise&en&évidence&du&processus&d’adressage&d’ARNm&cytosoliques&à&la&
surface&des&mitochondries&chez&les&plantes.&....................................................................&117&
I.#Mise#en#évidence#du#processus#chez#la#pomme#de#terre.#....................................................................#117#

ARTICLE#1……………………………………………………………………………………………………………...119#
II.#Mise#en#évidence#du#processus#chez#Arabidopsis#thaliana.#..............................................................#129#
1.#Optimisation#du#protocole#d’extraction#des#mitochondries.#.......................................................#129#
2.#Choix#des#gènes#candidats.#.........................................................................................................................#132#
3.#Résultats.#............................................................................................................................................................#132#
4.#Conclusion.#........................................................................................................................................................#133#

Chapitre& II& :& Etude& globale& du& processus& d’adressage& d’ARNm& aux& mitochondries&
de&pomme&de&terre.&...................................................................................................................&134&

I.#Le#génome#de#S.#tuberosum.#.............................................................................................................................#134#
II.#Détermination#des#ARNm#adressés#aux#mitochondries#de#S.#tuberosum#cicero#par#RNA#seq.
#..........................................................................................................................................................................................#135#
1.#Protocole#expérimental.#..............................................................................................................................#135#
2.#Analyse#des#données#de#séquençage#obtenues.#................................................................................#137#
III.#Perspectives.#........................................................................................................................................................#140#
1.#Analyse#des#ARNm#les#plus#associés#aux#mitochondries.#.............................................................#140#
2.#Adressage#d’ARNm#et#localisation#subcellulaire#des#protéines.#................................................#140#
3.#Adressage#d’ARNm#et#métabolisme.#......................................................................................................#141#
4.# Mécanisme# d’adressage# des# ARNm# à# la# surface# des# mitochondries#:# recherche# des#
éléments#cis#in#silico.#..........................................................................................................................................#144#

#
2ème&partie&:&Etude&du&mécanisme&d’adressage&du&messager&AtVDAC3&d’A.#thaliana#
à&la&surface&des&mitochondries………………………………………………………………………….146&
Chapitre&I&:&Les&protéines&VDAC&chez&les&plantes.&...........................................................&147&
I.#Analyse#des#séquences#et#des#structures#des#protéines#VDAC.#............................................................................#147#
1.#Analyse#des#séquences.#...................................................................................................................................................#147#
2.#Analyse#des#structures.#...................................................................................................................................................#148#
3.#Phylogénie#............................................................................................................................................................................#150#
II.#Expression#des#gènes#VDAC#chez#les#plantes.#.............................................................................................................#150#
III.#Fonctions#des#protéines#VDAC#........................................................................................................................................#151#
1.#VDAC#et#transport#de#métabolites#..............................................................................................................................#152#
2.#VDAC#et#mort#cellulaire#programmée.#......................................................................................................................#152#
3.#VDAC#et#croissance#cellulaire.#......................................................................................................................................#153#
4.#VDAC#et#stress.#....................................................................................................................................................................#153#
5.#VDAC#et#germination.#.......................................................................................................................................................#154#
6.#VDAC#et#import#d’acides#nucléiques.#........................................................................................................................#154#
7.#VDAC#et#ses#partenaires#protéiques.#.........................................................................................................................#154#
IV.#Double#localisation#des#protéines#VDAC.#....................................................................................................................#155#
1.#Comment#étudier#la#localisation#des#protéines#VDAC#?#....................................................................................#155#
2.#Localisation#dans#les#membranes#plasmiques.#.....................................................................................................#156#
3.#Localisation#dans#les#peroxysomes#............................................................................................................................#157#
4.#Localisation#dans#d’autres#types#de#structures.#...................................................................................................#157#

Chapitre&II&:&Caractérisation&du&messager&AtVDAC3&......................................................&158&
I.#Analyse#des#banques#de#données.#.....................................................................................................................................#158#
II.#Analyses#moléculaires#..........................................................................................................................................................#159#
III.#Analyse#des#sites#de#clivage#et#de#polyadénylation.#...............................................................................................#159#
IV.#Analyse#d’un#nouveau#variant#d’épissage.#..................................................................................................................#160#
V.#Conclusion.#.................................................................................................................................................................................#161#

Chapitre&III&:&Etude&de&l’association&différentielle&des&ARNm&AtVDAC3&à&la&surface&
des&mitochondries&par&la&technique&de&l’ARN&vert.&........................................................&162&
I.#Principe.#........................................................................................................................................................................................#162#
II.#Validation#de#la#technique#d’ARN#vert#chez#Nicotiana#benthamiana.#..............................................................#162#
III.#Analyse#des#premières#constructions#AtVDAC3#fusionnées#à#12SL.#...............................................................#164#
1.#Choix#des#ARNm#candidats.#...........................................................................................................................................#164#
2.#Premières#constructions#réalisées.#............................................................................................................................#164#
3.#Deuxièmes#constructions#réalisées.#..........................................................................................................................#166#
4.#Troisièmes#constructions#réalisées.#..........................................................................................................................#169#
IV.#Analyse#des#constructions#fusionnées#à#24SL#par#microscopie#confocale.#..................................................#171#
1.# Validation# de# la# technique# des# ARN# verts# afin# de# mettre# en# évidence# l’association# d’ARNm# aux#
mitochondries#chez#N.#benthamiana.#.............................................................................................................................#171#
2.#Etude#de#l’adressage#aux#mitochondries#des#constructions#AtVDAC3courtT24SL#et#AtVDAC3longΔT
24SL.#.............................................................................................................................................................................................#174#
3.#Délimitation#des#éléments#cis#d’adressage#du#messager#AtVDAC3#aux#mitochondries.#....................#175#
4.#Conclusion.#...........................................................................................................................................................................#177#

Chapitre&IV&:&Complémentation&d’un&mutant&atvdac3&de&plante.&...............................&178&
I.#Les#mutants#d’insertion#ADNTT#chez#A.#thaliana.#.......................................................................................................#178#
II.#Caractérisation#de#deux#lignées#d’insertion#d’ADNTT#AtVDAC3.#........................................................................#179#
1.#Génotypage#...........................................................................................................................................................................#180#
2.#Analyse#de#l’expression#du#gène#AtVDAC3#dans#les#mutants#d’insertion.#................................................#181#
3.#Phénotype#des#mutants#atvdac3.3#et#atvdac3.4.#...................................................................................................#182#
III.#Analyse#de#l’adressage#des#ARNm#AtVDAC3#chez#le#mutant#atvdac3.4.#........................................................#183#
1.#Expression#des#différentes#constructions#chez#les#transformants#atvdac3.4.#.........................................#184#
2.#Adressage#des#ARNm#AtVDAC3#à#la#surface#des#mitochondries#de#plantules#Col0#et#atvdac3.4.#...#185#
3.#Adressage#des#ARNm#AtVDAC3#chez#les#transformants#atvdac3.4#+#Long#et#atvdac3.4#+#Court.#...#186#
4.#Adressage#des#ARNm#AtVDAC3#chez#les#transformants#atvdac3.4#+#LongΔ#et#atvdac3.4#+#CDS.#...#187#

5.#Conclusion.#...........................................................................................................................................................................#187#
IV.# Analyse# de# la# quantité# de# protéines# AtVDAC3# présente# dans# les# mitochondries# des# transformants#
atvdac3.4.#.........................................................................................................................................................................................#188#

Chapitre&V&:&Complémentation&d’un&mutant&Δpor1&de&levure.&....................................&189&
I.#Les#mutants#Δpor1#de#levure.#..............................................................................................................................................#189#
II.#Complémentations#de#mutants#Δpor1.#..........................................................................................................................#189#
1.#Analyse#des#transformants#Δpor1.#.............................................................................................................................#190#
2.#Analyses#des#transformants#M3.#.................................................................................................................................#193#
3.#Conclusion.#...........................................................................................................................................................................#194#

Chapitre&VI&:&Conclusion&et&perspectives.&..........................................................................&196&
I.# Confirmation# de# l’adressage# différentiel# d’ARNm# aux# mitochondries# végétales# in#vivo# par# ARN# vert.
#..............................................................................................................................................................................................................#196#
II.#Mécanisme#d’adressage#du#messager#AtVDAC3#à#la#surface#des#mitochondries#végétales.#..................#197#
1.#Les#éléments#cis#impliqués#dans#l’adressage#de#l’ARNm#AtVDAC3#à#la#surface#des#mitochondries.
#........................................................................................................................................................................................................#197#
2.# Recherche# des# facteurs# trans# impliqués# dans# l’adressage# du# messager# AtVDAC3# à# la# surface# des#
mitochondries#végétales.#....................................................................................................................................................#203#
3.#Transport#des#ARNm#à#la#surface#des#mitochondries.#......................................................................................#204#
III.#Rôles#du#processus#d’adressage#d’ARNm#cytosoliques#à#la#surface#des#mitochondries#végétales.#...#205#
IV.# Rôles# des# différentes# isoformes# de# l’ARNm# AtVDAC3# dans# le# double# adressage# de# la# protéine#
AtVDAC3.#..........................................................................................................................................................................................#206#

&
3ème& partie&:& Analyse& des& gènes& d'ARN& de& transfert& dans& les& génomes& de&
plantes………………………………………………………………………………………………………………210&
Chapitre&I&:&Analyse&des&gènes&d'ARNt&dans&les&génomes&de&plantes&.......................&210&
ARTICLE#1……………………………………………………………………………………………………………...213#
Chapitre&II&:&Création&d'une&banque&de&données&d'ARNt&végétaux&...........................&245&
I.#Caractéristiques#de#la#banque#plantRNA#........................................................................................................................#245#
II.#Utilisation#de#la#banque#de#données#plantRNA.#.........................................................................................................#246#
1.#Page#d'acceuil#......................................................................................................................................................................#246#
2.#Recherche#par#ARNt#.........................................................................................................................................................#246#
3.#Recherche#par#espèce.#.....................................................................................................................................................#247#
4.#Recherche#par#enzyme#....................................................................................................................................................#247#

ARTICLE#3……………………………………………………………………………………………………………...248#

&
CONCLUSION……………………………………………………………………………………………………..263&
ANNEXE&1………………………………………………………………………………………………………….267&
ANNEXE&2………………………………………………………………………………………………………….270&
BIBLIOGRAPHIE………………………………………………………………………………………………..295&
&

ABREVIATIONS+
aa":"Acide"aminé""
aaRS":"Aminoacyl"ARNt"synthétase"
ADN":"Acide"désoxyribonucléique"
ADNc":"ADN"complémentaire"
APS":"Persulfate"d’ammonium"
ARN":"Acide"ribonucléique"
ARNm":"ARN"messager"
ARNr":"ARN"ribosomique"
ARNt":"ARN"de"transfert"
ATP":"Adénosine"triphosphate"
BET":"Bromure"d’éthidium"
BSA":"Bovine"serum"albumine"
°C":"Degré(s)"Celsius"
Ci":"Curie"
CSPD":"

Disodium"

3I(4ImethoxyspiroI3,2’(5’Ichloro)tricyclo[3.3.1.13,7]decan)"

phosphate"
Ct":"Cycle"seuil"
Da":"Dalton"
dATP":"DésoxyIadénosine"triphosphate"
DEPC":"DiéthylIpyrrocarbonate"
dGTP":"DésoxyIguanosine"triphosphate"
DIG":"Digoxigénine"
DNase":"Désoxyribonucléase"
DO":"Densité"optique"
DTT":"Dithiothréitol"
dTTP":"DésoxyIthymidine"triphosphate"
dUTP":"DésoxyIuridine"triphosphate"
EDTA":"Acide"éthylèneIdiamine"tétraacétique"
EGTA":"Acide"éthylène"glycol"tétraacétique"
ER":"Réticulum"endoplasmique"
GFP":"Green"fluorescent"protein"
GTP":"Guanosine"triphosphate"

phenyl"

IPTG":"IsopropylIβIDIthiogalactoside"
kb":"kilopaire"bases"
kDA":"Kilodalton"
mA":"Milliampère"
MCC":"Magnésium"chloramphénicol"cycloheximide"
MES":"Acide"2I(NImorpholino)éthanesulfonique"
MOPS":"Acide"3I(NImorpholino)propanesulfonique"
MPP":"Mitochondrial"processing"peptidase"
MTS":"Mitochondrial"targeting"sequence"
NLS":"Nuclear"localization"signal"
nt":"nucléotide"
p/v""Poids"à"volume"
PAL":"Phosphatase"alcaline"
pb":"Paire"de"bases"
PBS":"Phosphate"Buffered"Saline"
PCR":"Polymerase"chain"reaction"
PEG":"Polyéthylène"Glycol"
PNK":"Polynucléotide"kinase"
PVP":"Polyvinylpyrrolidone"
qRTIPCR":"RTIPCR"quantitative"
RNase":"Ribonucléase"
RFP":"Red"fluorescent"protein"
RT":"Tanscription"reverse"
SAM":"Sorting"and"Assembly"Machinery"
SDS":"Sodium"dodécyl"sulfate"
SPP":"Stromal"processing"peptidase"
SSC":"Citrate"de"sodium,"NaCl"
TAE":"TrisIacétateIEDTA"
TBE":"TrisIborateIEDTA"
TEMED":"N,N,N’,N’Itétraméthyléthylène"diamine"
TIM":"Translocase"of"the"Inner"membrane"of"Mitochondria"
TOM":"Translocase"of"the"Outer"membrane"of"Mitochondria"
Tris":"Tris(hydroxyméthyl)aminométhane"

TTP":"Thymidine"triphosphate"
TTP":"Thymidine"triphosphate"
U":"Unité"enzymatique"
UTR":"Région"non"traduite"
v/v":"Volume"à"volume"
VDAC":"Voltage"Dependant"Anion"Channel"
XIGal":"5IbromoI4IchloroI3IindoleIβIDIgalactopyrranoside"

PREFACE'
Les$ mitochondries$ sont$ des$ organites$ issus$ de$ l’embosymbiose$ d’une$ α6
protéobactérie$par$une$cellule$eucaryote$primitive$il$y$a$environ$deux$milliard$d’années.$
Au$ cours$ de$ l’évolution,$ un$ transfert$ massif$ de$ gènes$ s’est$ opéré$ du$ génome$ bactérien$
vers$le$gène$nucléaire$de$la$cellule$hôte.$Le$résultat$de$ce$transfert$se$traduit$aujourd’hui$
par$ la$ présence$ dans$ les$ mitochondries$ de$ génomes$ de$ petites$ tailles$ renfermant$ une$
très$ faible$ proportion$ des$ gènes$ nécessaires$ à$ la$ biogénèse$ et$ la$ fonction$ de$ ces$
organites.$ De$ ce$ fait,$ dans$ les$ cellules,$ la$ majorité$ des$ protéines$ mitochondriales$ sont$
codées$par$le$génome$nucléaire.$Chez$de$nombreux$organismes,$comme$chez$les$plantes$
et$ les$ protozoaires,$ un$ nombre$ important$ de$ gènes$ codant$ des$ ARNt$ nécessaires$ à$ la$
traduction$ mitochondriale$ sont$ également$ localisés$ dans$ le$ génome$ nucléaire.$ Toutes$
ces$ molécules$ (protéines$ et$ ARNt)$ sont$ synthétisées$ à$ l’extérieur$ du$ compartiment$
mitochondrial$ et$ doivent$ donc$ être$ spécifiquement$ importés$ dans$ les$ mitochondries$
après$synthèse.$$
Mon$projet$de$thèse$s’inscrit$dans$la$problématique$générale$de$compréhension$des$
mécanismes$mis$en$place$au$cours$de$l’évolution$afin$de$permettre$un$adressage$et$une$
importation$ spécifique$ des$ macromolécules$ dans$ les$ mitochondries$ suite$ à$ la$
relocalisation$ des$ gènes$ correspondant$ dans$ le$ génome$ nucléaire.$ L’ensemble$ des$
mécanismes$$caractérisés$à$ce$jour$chez$les$plantes$ou$bien$chez$d’autres$organismes$est$
présenté$ dans$ la$ partie$ Introduction$ de$ ma$ thèse.$ Cette$ introduction$ correspond$ à$ un$
chapitre$ que$ nous$ avons$ rédigé$ dans$ le$ volume$ 63$ du$ livre$ «Advance$ in$ Botanica$
Research$:$Mitochondrial$Genome$Evolution$».$Ce$chapitre$comporte$une$description$des$
signaux$ ainsi$ que$ des$ mécanismes$ impliqués$ dans$ l’adressage$ et$ l’importation$ des$
protéines$ dans$ les$ mitochondries.$ La$ majorité$ des$ signaux$ identifiés$ à$ l’heure$ actuelle$
sont$ présents$ au$ niveau$ de$ la$ protéine$ elle6même.$ Mais$ ces$ dernières$ années,$ il$ a$ été$
démontré$que$des$signaux$présents$au$niveau$de$l’ARNm$pouvaient$être$impliqués$dans$
l’adressage$ des$ protéines$ à$ la$ surface$ des$ mitochondries$ de$ mammifère$ et$ de$ levure.$
Nous$avons$également$présenté$les$signaux$et$mécanismes$impliqués$dans$les$processus$
de$double$adressage$de$protéines$dans$deux$compartiments$subcellulaires$différents.$Le$
processus$de$double$adressage$concerne$un$nombre$croissant$de$protéines,$surtout$chez$
les$plantes$où$un$grand$nombre$de$protéines$ont$été$reportées$comme$étant$doublement$
localisées$dans$les$mitochondries$et$les$chloroplastes.$Enfin,$nous$avons$présenté$dans$

ce$ chapitre,$ l’ensemble$ des$ données$ concernant$ l’adressage$ et$ l’importation$
mitochondriale$des$ARNt$cytosoliques$chez$les$végétaux.$$
Au$cours$de$ces$trois$années$de$thèse,$nos$travaux$au$laboratoire$ont$principalement$
portés$ sur$ l’exploration$ d’un$ nouveau$ mécanisme,$ jamais$ décrit$ chez$ les$ plantes,$
pouvant$ être$ impliqué$ dans$ l’adressage$ des$ protéines$ aux$ mitochondries.$ Il$ s’agit$ du$
processus$ d’adressage$ d’ARNm$ à$ la$ surface$ des$ mitochondries$ végétales.$ Les$ résultats$
présentés$ dans$ ce$ manuscrit$ sont$ divisés$ en$ trois$ grandes$ parties.$ La$ première$ partie$
des$ résultats$ concerne$ la$ mise$ en$ évidence$ de$ l’existence$ de$ ce$ processus$ chez$ deux$
espèces$végétales$(pomme$de$terre$et$A.#thaliana)$et$présente$l’approche$utilisée$afin$de$
mesurer$ l’étendue$ de$ ce$ processus$ chez$ la$ pomme$ de$ terre.$ La$ deuxième$ partie$ des$
résultats$présente$l’étude$du$mécanisme$et$de$la$fonction$du$processus$d’adressage$à$la$
surface$ des$ mitochondries$ d’un$ ARNm$ candidat$ chez$ A.# thaliana# (AtVDAC3).$ Enfin,$ la$
troisième$ partie$ des$ résultats$ s’inscrit$ dans$ la$ problématique$ d’adressage$ et$
d’importation$des$ARNt$cytosoliques$dans$les$mitochondries$végétales$et$correspondant$
à$la$caractérisation$de$l’ensemble$des$gènes$d’ARNt$présents$dans$différents$génomes$de$
plantes$par$une$approche$bioinformatique.$$$
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INTRODUCTION!

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L’introduction!de!cette!thèse!correspond!au!chapitre!rédigé!dans!le!livre!«!Advance!
in! Botanica! Research!:! Mitochondrial! Genome! Evolution!».! Les! figures! en! couleur! sont!
présentes!à!la!fin!de!ce!chapitre.!
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