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Biopathologie
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 Françoise
 GALATEAU-­‐SALLE
 
Groupe
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 Marine
 &
 Antoine
 

 


 

 

 


 

L’anatomopathologie
 
Moyens
 et
 objectifs
 

Place
 dans
 la
 médecine
 du
 
XXI
 éme
 siècle
 

 


 

 

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TABLE
 DES
 MATIERES
 

 
Introduction…………………………………………………..…p.3
 

 
A/Historique………………………………………...............p.4
 

 
B/Définition……………………………………….…………….p.5
 

 

C/Démarche
 anatomoclinique…………………p.7
 
1/Les
 outils
 
a/Les
 procédures
 
 
 
i.
 

La
 cytologie………………………………………..p.8
 

ii.
 

La
 biopsie…………………………………………..p.10
 

iii.
 

L’examen
 extemporané……………………..p.11
 

iv.
 

La
 pièce
 opératoire…………………………...p.11
 

v.
 

L’autopsie………………………………………....p.12
 

vi.
 

L’immunohistochimie………………………..p.13
 

vii.
 

La
 biologie
 moléculaire……………………...p.14
 


 

b/Les
 méthodes
 
i.
 

La
 macroscopie…………………………………..p.16
 

ii.
 

La
 microscopie
 optique
 ……………………...p.16
 


 

 


 

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Introduction
 
Un
 anatomopathologiste
 n’est
 pas
 un
 biologiste
 mais
 bel
 et
 bien
 un
 médecin
 :
 le
 
diagnostic
 repose
 sur
 l’histoire
 clinique
 d’un
 patient.
 Il
 est
 par
 exemple
 important
 pour
 
l’anatomopathomogiste
 de
 savoir
 si
 le
 patient
 a
 fait
 une
 chute
 auquel
 cas
 la
 lésion
 sur
 le
 
crâne
 visible
 ici
 ne
 serait
 pas
 inquiétante.
 


 
La
 médecine
 légale,
 quant
 à
 elle,
 est
 une
 branche
 de
 l’anatomopathologie
 à
 la
 
différence
 qu’elle
 ne
 cherche
 pas
 expliquer
 la
 cause
 de
 la
 maladie
 mais
 la
 cause
 du
 décès.
 


 


 

 
Petit
 rappel
 sur
 deux
 initiateurs
 majeurs
 de
 l’AP
 (anatomopathologie):
 
Bichat
 (né
 en
 1771)
 à
 écrit
 un
 traité
 des
 membranes
 :
 «
 il
 faut
 voir
 avant
 de
 réfléchir
 
saisir
 les
 apparences
 avant
 de
 pénétrer
 les
 causes,
 nos
 idées
 sont
 vagues
 sur
 tout
 objet
 
extérieur
 si
 elles
 ne
 sont
 pas
 pour
 nous
 autant
 d’images
 ».
 Il
 faut
 rattacher
 ce
 que
 l’on
 voit
 
aux
 symptômes
 et
 à
 la
 cause
 de
 la
 maladie.
 «
 La
 vie
 est
 la
 somme
 totales
 des
 fonctions
 qui
 
résistent
 à
 la
 mort
 ».
 
Laennec
 (né
 en
 1781)
 à
 commencé
 à
 enseigner
 l’AP
 et
 à
 inventé
 le
 stéthoscope
 alors
 
qu’il
 était
 chef
 de
 clinique
 à
 Necker,
 lui
 permettant
 de
 découvrir
 la
 séméiologie
 thoracique.
 
Il
 décrète
 que
 l’observation
 AP
 doit
 être
 reliée
 à
 l’histoire
 clinique
 du
 patient.
 Ainsi,
 une
 
même
 lésion
 cutané
 peut-­‐être
 diagnostiquée
 bénigne
 ou
 maligne
 selon
 qu’elle
 se
 trouve
 
chez
 un
 enfant
 ou
 un
 adulte.
 Du
 contexte
 découle
 le
 diagnostic
 :
 il
 ne
 faut
 donc
 jamais
 
perdre
 de
 vue
 la
 lésion.
 «
 La
 méthode
 AP
 est
 la
 seule
 base
 de
 connaissances
 positives,
 on
 ne
 
doit
 jamais
 la
 perdre
 de
 vue
 sous
 peine
 de
 poursuivre
 des
 chimères
 ».
 
 
 


 

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A/Historique
 
Les
 égyptiens
 pratiquaient
 déjà
 l’autopsie
 (Papyrus
 d’Eber).
 
Les
 grecs,
 selon
 le
 dogme
 de
 l’Ecole
 d’Hippocrate
 (460-­‐377),
 basent
 le
 diagnostic
 de
 la
 
maladie
 sur
 la
 théorie
 des
 humeurs.
 
Les
 perses
 pratiquent
 les
 dissections
 anatomiques
 sur
 les
 cadavres
 des
 champs
 de
 bataille,
 
notamment
 
 sous
 l’impulsion
 d’Avicenne
 (980-­‐1037).
 
Claude
 Bernard
 est
 le
 véritable
 responsable
 de
 l’avènement
 de
 l’anatomopathologie
 
moderne
 (1813-­‐1878).
 
Hermann
 Boerhave
 (1668-­‐1738)
 autopsie
 des
 médecins
 décédés
 pour
 découvrir
 la
 cause
 de
 
la
 maladie.
 
Giovanni-­‐Batista
 Morgagni
 (1682-­‐1771)
 de
 l’école
 de
 Padoue
 met
 en
 évidence
 la
 relation
 de
 
cause
 à
 effet
 entre
 les
 lésions
 constatées
 chez
 le
 cadavre
 et
 la
 séméiologie
 clinique.
 
 
Xavier
 Bichat
 (1771-­‐1802)
 chirurgien
 de
 l’Hôtel
 Dieu
 reconnaît
 pour
 la
 première
 fois
 la
 
notion
 de
 tissu
 et
 développe
 les
 méthodes
 anatomocliniques.
 
Virchow
 (1821-­‐1902)
 :
 développe
 la
 théorie
 cellulaire
 initiée
 par
 Schwann
 en
 1839,
 créant
 
ainsi
 l’histologie
 (l’étude
 des
 tissus
 biologiques).
 
Watson
 et
 Crick
 :
 découvrent
 la
 structure
 de
 l’ADN
 en
 1953.
 
Taylor
 (1880)
 :
 principe
 de
 l’analyse
 immunohistochimique.
 


 

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B/Définition
 

 

L’anatomopathologie
 c’est
 l’étude
 (logos)
 de
 la
 souffrance
 (pathos)
 des
 tissus.
 
 
La
 démarche
 anatomopathologique
 s’appuie
 sur
 une
 séméiologie
 diagnostique
 (c’est
 
l’histoire
 clinique)
 et
 repose
 sur
 un
 raisonnement
 analogique
 (comparaison
 de
 tissus
 et
 de
 
cellules
 normales
 et
 pathologiques).
 
L’étude
 de
 la
 lésion
 se
 définit
 comme
 une
 altération
 morphologique
 (forme-­‐
structure-­‐architecture)
 secondaire
 à
 un
 processus
 (c’est
 l’étiologie
 =
 l’étude
 des
 causes).
 
Une
 fois
 l’étiologie
 déterminée,
 le
 clinicien
 peut
 entrer
 en
 action.
 

 
Avec
 la
 naissance
 de
 la
 génétique
 et
 de
 la
 biologie
 moléculaire,
 l’AP
 
 devient
 aussi
 
une
 discipline
 à
 visée
 diagnostique
 et
 thérapeutique.
 

 
On
 peut
 donc
 l’envisager
 comme
 la
 description
 de
 lésions
 élémentaires
 qui
 sont
 
cause
 de
 maladies
 représentant
 des
 processus
 inflammatoires,
 dégénératifs,
 néoplasiques
 
ou
 circulatoires.
 Ils
 peuvent
 être
 héréditaires,
 congénitaux
 ou
 causés
 par
 un
 agent
 
perturbateur
 qui
 va
 induire
 une
 réaction
 de
 l’hôte.
 
 

 
Cet
 ensemble
 agent
 nuisible
 +
 réaction
 hôte
 conduit
 à
 la
 maladie/pathologie
 dont
 on
 
expliquera
 les
 causes
 par
 une
 étiologie
 et
 un
 mécanisme.
 Une
 fois
 les
 manifestations
 
(cérébrales,
 cutanées,
 etc.)
 établies
 grâce
 à
 l’étude
 de
 certains
 marqueurs
 biologiques,
 une
 
synthèse
 va
 permettre
 à
 l’anatomopathologiste
 de
 :
 
 
 déterminer
 le
 diagnostic
 lésionnel
 
 

 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 le
 diagnostic
 étiologique
 
 évaluer
 le
 pronostic
 de
 la
 lésion
 (locale,
 régionale,
 systémique)
 
 

 
 envisager
 l’évolution
 de
 celle-­‐ci,
 posant
 ainsi
 les
 bases
 du
 traitement
 (médical,
 
chirurgical,
 radio
 ou
 chimiothérapie).
 


 

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 Agent
 nuisible
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 +
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 réaction
 hote
 

 
 
 
 
 
 
 
 
 =
 


 


 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 maladie
 

 

 

 
inflammatoire
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 dégénérative
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 néoplasique
 

 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 

 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 

 
 
 
 
 
 
 
 
 

 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 pathologie
 
causes
 :
 étiologie
 
 

 
 

 
 
 
 mécanisme
 
manifestations
 
évolution
 

 


 


 

 


 

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C/Démarche
 anatomoclinique
 
Démarche
 diagnostique,
 c’est
 ce
 qui
 fait
 de
 l’AP
 une
 discipline
 médicale.
 Comme
 la
 
démarche
 clinique,
 elle
 repose
 sur
 :
 
 Les
 renseignements
 cliniques
 auprès
 du
 patient
 
 L’étude
 des
 altérations
 macroscopiques
 
 
 L’étude
 des
 altérations
 histologiques
 

 

1/Les
 outils
 

 
a/Les
 procédures
 
 
 
 
i.
 

La
 cytologie
 (structures
 des
 cellules)
 

ii.
 

La
 biopsie
 (exérèse
 chirurgicale)
 

iii.
 

L’examen
 extemporané
 

iv.
 

La
 pièce
 opératoire
 

v.
 

L’autopsie
 (Loi
 n°94-­‐654
 du
 29
 juillet
 1994)
 

vi.
 

L’immunohistochimie
 

vii.
 

La
 biologie
 moléculaire
 

 

 

b/Les
 méthodes
 


 

i.
 

La
 macroscopie
 

ii.
 

La
 microscopie
 optique
 
 

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a/Les
 procédures
 
 
 
 


 
i.

La
 cytologie
 

Elle
 étudie
 les
 cellules.
 C’est
 une
 démarche
 très
 courante
 car
 peu
 agressive
 vis-­‐à-­‐vis
 du
 
patient,
 peu
 cher
 donc
 rentables,
 mais
 présentant
 des
 limites.
 
 Par
 frottis*
 (cervicaux,
 vaginaux)
 à
 la
 recherche
 de
 lésions
 précancéreuses
 (dues
 
au
 papillomavirus
 par
 exemple)
 
 Par
 raclage*,
 brossage*,
 écouvillonnage*,
 aspirations.
 Ces
 méthodes
 
permettent
 de
 recueillir
 les
 cellules
 qui
 desquament
 (sachant
 que
 les
 cellules
 
néoplasiques
 commencent
 à
 desquamer
 un
 an
 avant
 de
 pouvoir
 détecter
 un
 
cancer,
 d’où
 l’intérêt
 stratégique
 du
 dépistage.)
 
 Cytologie
 d’aspiration
 et
 lavage
 alvéolaire
 (injection
 de
 liquide
 dans
 un
 segment
 
pathologique
 puis
 recueil
 et
 analyse
 des
 cellules
 récupérées).
 
 Par
 recueil
 d’un
 épanchement
 (pleural,
 ascite)
 
 Par
 cytoponction
 d’un
 organe
 plein
 (thyroïde,
 sein,
 ganglion)
 
 Par
 apposition
 sur
 une
 lame
 d’un
 morceau
 de
 lésion
 (c’est
 la
 «
 marque
 »
 laissée
 
sur
 la
 lame
 que
 l’on
 observe,
 
 càd
 quelque
 cellules
 seulement)
 
*le
 principes
 de
 ces
 méthodes
 est
 quasiment
 le
 même
 (recueillir
 des
 cellules
 par
 interaction
 
mécanique).
 


 

 

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Les
 techniques
 d’observations
 s’étant
 considérablement
 améliorées,
 on
 utilise
 parfois
 
le
 scanner
 qui
 permet
 d’étudier
 des
 lésions
 de
 moins
 de
 0.5mm
 de
 diamètre.
 L’association
 
«
 radpath
 »
 est
 aussi
 de
 plus
 en
 plus
 courantes
 (ponctions
 radioguidées
 nécessitant
 une
 
précision
 extrême,
 type
 pancréatique
 ou
 pleurale
 par
 exemple).
 

 
NB
 :
 inutile
 de
 prélever
 si
 c’est
 pour
 gâcher
 la
 marchandise
 :
 dès
 qu’il
 est
 retiré
 de
 
l’organisme,
 la
 situation
 d’ischémie
 (arrêt
 de
 l’irrigation
 sanguine)
 conduit
 au
 phénomène
 
d’autolyse
 du
 tissu
 (cytolyse
 quand
 on
 parle
 des
 cellules).
 Il
 est
 donc
 impératif
 de
 le
 faire
 
parvenir
 rapidement
 au
 labo.
 Si
 le
 délai
 risque
 d’être
 trop
 long
 (une
 conservation
 en
 milieu
 
froid
 est
 viable
 24h
 environ),
 il
 est
 nécessaire
 de
 
 le
 fixer.
 Une
 fois
 fixées,
 les
 cellules
 sont
 
colorées
 au
 papanicolaou
 (coloration
 différentielle
 acide/base).
 
 

 

 
En
 pratique
 :
 pour
 former
 une
 lame
 microscopique,
 on
 appose
 le
 prélèvement
 sur
 
une
 lame
 et
 on
 l’étale
 avec
 le
 bord
 d’une
 seconde
 sans
 trop
 l’écraser.
 Dans
 le
 cas
 d’un
 
liquide,
 on
 utilise
 une
 cytocentrifugeuse.
 On
 recueil
 alors
 le
 culot
 de
 centrifugation
 que
 l’on
 
peut
 étaler
 ou
 fixer
 dans
 de
 la
 paraffine.
 Des
 coupes
 ultrafines
 sont
 réalisées
 pour
 
permettre
 l’observation
 microscopique.
 

 
Les
 hématies
 et
 les
 leucocytes,
 communs
 à
 tous
 les
 tissus,
 servent
 d’étalons
 en
 
microscopie.
 Ils
 permettent
 d’évaluer
 la
 taille
 des
 éléments
 les
 uns
 par
 rapport
 aux
 autres
 
et
 donc
 d’observer
 un
 élément
 d’une
 grandeur
 éventuellement
 anormale.
 
Un
 prélèvement
 qui
 ne
 contient
 pas
 assez
 de
 cellules
 est
 dit
 non
 diagnostic
 ou
 non
 
significatif
 :
 il
 est
 nécessaire
 d’en
 refaire
 un
 pour
 déterminer
 s’il
 y
 a
 réellement
 une
 
anomalie.
 


 

 

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Les
 prélèvements
 tissulaires
 
ii.

La
 biopsie
 

C’est
 le
 prélèvement
 d’un
 fragment
 de
 tissu
 sur
 un
 être
 vivant
 qui
 va
 permettre
 de
 
différencier
 des
 maladies
 inflammatoires,
 de
 porter
 un
 diagnostic
 de
 tumeur
 (et
 de
 
pathologies
 dégénératives)
 ou
 de
 montrer
 l’existence
 de
 troubles
 circulatoires.
 

 
La
 valeur
 de
 la
 biopsie
 repose
 sur:
 






Taille
 
Le
 nombre
 
Le
 choix
 de
 la
 lésion
 biopsiée
 
La
 bonne
 préservation
 du
 tissu
 
Le
 repérage
 topographique
 (par
 celui
 qui
 va
 prélever)
 


 


 
Biopsie
 de
 muqueuse
 colique
 
NB
 :
 un
 prélèvement
 dans
 une
 zone
 hémorragique
 ou
 nécrosée
 est
 à
 exclure
 puisque
 
ininterprétable
 (prélèvement
 non
 significatif).
 

 

 

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Pour
 permettre
 un
 bon
 diagnostic
 AP,
 il
 est
 nécessaire
 de
 bien
 situer
 la
 zone
 prélevée
 
et
 séparer
 les
 différents
 échantillons
 afin
 de
 ne
 pas
 créer
 de
 confusion,
 surtout
 en
 cas
 de
 
métaplasie
 (transformation
 d'un
 tissu
 cellulaire
 différencié
 en
 un
 autre
 tissu
 cellulaire
 
différencié).
 

 
iii.

Examen
 extemporané
 

Le
 chirurgien
 découvre
 lors
 de
 l’intervention
 une
 lésion
 suspecte.
 Pour
 savoir
 s’il
 doit
 
l’enlever
 ou
 non
 il
 pratique
 un
 examen
 immédiat.
 
 
Pour
 cela
 on
 utilise
 :
 
Des
 coupes
 à
 congélation
 réalisées
 sur
 du
 matériel
 frais
 (non
 fixé)
 dans
 un
 cryostat
 à
 –20°(il
 
s’agit
 en
 fait
 d’un
 microtome
 permettant
 de
 garder
 une
 température
 de
 -­‐20°)(un
 
microtome
 est
 une
 machine
 d’analyse
 cellulaire).
 

 
Les
 coupes
 sont
 colorées
 et
 examinées
 au
 microscope
 en
 moins
 de
 20mn
 contre
 24h
 pour
 
un
 examen
 en
 temps
 normal.
 
 

 

 
iv. La
 pièce
 opératoire
 
 
L’étude
 de
 la
 pièce
 opératoire
 consiste
 à
 établir
 le
 bilan
 des
 lésions
 (nombre,
 siège,
 
aspect,
 extension,
 effets
 thérapeutiques).
 
Prise
 en
 charge
 macroscopique
 des
 pièces
 chirurgicales
 
Renseignements
 cliniques
 indispensables
 :
 
 Données
 de
 l’imagerie
 (T,
 lésions
 d’obstruction,
 ganglions
 sous-­‐pleuraux)
 
 Chimiothérapie
 néoadajuvante
 (prétraitement
 administré
 afin
 de
 réduire
 la
 
taille
 d'une
 tumeur
 cancéreuse
 avant
 une
 intervention
 chirurgicale)
 
 Exposition
 professionnelle
 à
 des
 aéro-­‐contaminants
 (prélèvements
 ciblés)
 
 Collecte
 de
 la
 pièce
 
 
Rapidement
 depuis
 bloc
 (1/2
 heure)
 
 
Si
 différée
 pièce
 sur
 bloc
 de
 glace
 ou
 conservée
 au
 frigidaire
 
 Fixation
 
Injection
 endobronchique
 (dans
 l’exemple)
 de
 formaldéhyde
 à
 4%
 sous
 
pression
 contrôlée
 
Échantillonnage
 24
 à
 48
 H
 plus
 tard
 
Résultats
 en
 72
 h
 


 

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Morceau
 de
 poumon.
 On
 peut
 voir
 une
 petite
 tumeur
 dans
 la
 bronche
 

 
v.

Autopsie
 

Examen
 pratiqué
 sur
 un
 corps
 dans
 un
 but
 scientifique
 
 soit
 pour
 rechercher
 la
 cause
 de
 décès
 
 
 soit
 dans
 le
 cadre
 d’un
 conseil
 génétique
 (fœtopathologie).
 

 
Demande
 faite
 par
 le
 médecin
 traitant
 ou
 la
 famille
 
 Faire
 une
 demande
 écrite
 
 S’assurer
 de
 la
 présomption
 de
 consentement
 en
 consultant
 le
 registre
 national
 
des
 refus
 (code
 de
 santé
 publique
 article
 L.
 671-­‐7)
 
 Informer
 la
 famille
 des
 prélèvements
 (code
 de
 santé
 publique
 article
 L.
 671-­‐9)
 
 Faire
 contresigner
 le
 formulaire
 par
 le
 directeur
 général
 de
 l’hôpital
 

 
A
 différencier
 des
 autopsies
 médicolégales
 demandées
 par
 les
 autorités
 judiciaires
 ou
 
administratives
 et
 réalisées
 par
 des
 médecins
 légistes.
 Cependant,
 il
 existe
 une
 dérogation
 
demandée
 au
 procureur
 qui
 s’applique
 dans
 des
 cas
 de
 suspicion
 de
 méningite
 à
 
méningocoques
 ou
 de
 maladies
 infectieuses
 mettant
 en
 jeu
 la
 santé
 publique.
 

 

 

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vi.

L’immunohistochimie
 


 
L’histochimie
 est
 en
 fait
 une
 réaction
 chimique
 réalisée
 sur
 un
 tissu
 qui
 permet
 par
 
exemple
 de
 retrouver
 des
 pigments,
 des
 éléments
 métalliques
 etc.
 …
 
L’immunohistochimie
 quant
 à
 elle
 est
 un
 outil
 qui
 permet
 de
 révéler
 la
 présence
 de
 
protéines
 au
 sein
 du
 tissu
 normal
 ou
 tumoral
 à
 l’aide
 d’une
 réaction
 Ag/Ac
 que
 l’on
 révèle
 
par
 un
 fluorochrome.
 On
 utilisera
 un
 microscope
 à
 fluorescence.
 Il
 s’agit
 alors
 
d’immunofluorescence.
 
On
 peut
 aussi
 utiliser
 une
 enzyme
 comme
 la
 peroxydase
 et
 l’on
 observera
 alors
 une
 
coloration
 rouge
 marron
 là
 où
 la
 réaction
 a
 eu
 lieu
 
Le
 succès
 de
 l’immunohistochimie
 dépend
 de
 la
 capacité
 de
 cette
 technique
 à
 mettre
 en
 
évidence
 ces
 protéines
 (nucléaire,
 membranaire,
 cytoplasmique).
 
 
Aujourd’hui,
 entre
 60
 et
 80
 Anticorps
 sont
 utilisés
 
 en
 routine
 au
 CHU
 de
 Caen
 contre
 1
 en
 
1980.
 

 

 
fluorochrome
 

 
anticorps
 
antigène
 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 
IMPORTANCE
 DE
 LA
 RIGUEUR
 TECHNIQUE
 

 

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Intérêt
 de
 l’analyse
 immunohistochimique
 :
 
 
 Démarche
 clinique
 :
 
Identification
 d’une
 tumeur
 épithéliale
 
Identification
 d’une
 tumeur
 mésenchymateuse
 
Identification
 d’une
 tumeur
 vasculaire
 
Identification
 d’une
 tumeur
 du
 système
 lymphoïde
 
 Démarche
 d’identification
 d’une
 sécrétion
 hormonale
 
Mammaire
 (Ca
 15.3,
 RE,
 RO)
 
Thyroïdienne
 (TG,
 TCT)
 
Prostate
 (PSA)
 

 
 Démarche
 de
 prise
 en
 charge
 thérapeutique
 en
 fonction
 des
 récepteurs
 détectés
 

 
vii. La
 biologie
 moléculaire
 

 
On
 étudie
 directement
 l’ADN
 ou
 l’ARN
 par
 le
 biais
 d’une
 sonde,
 qui
 nous
 permet
 de
 
comprendre
 l’expression
 d’une
 protéine.
 On
 fait
 de
 la
 biopathologie.
 On
 passe
 du
 génome
 
(ADN)
 au
 protéome
 (protéine).
 
Parmi
 les
 techniques
 utilisées
 on
 compte
 la
 CGH
 array
 qui
 permet
 de
 détecter
 les
 
translocations.
 


 


 

 

 

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Ex
 :
 détection
 d’un
 rhabdomyosarcome
 en
 détectant
 les
 translocations
 qui
 conduisaient
 à
 la
 
production
 de
 protéines
 particulières
 comme
 la
 myogénine.
 Ceci
 permet
 d’utiliser
 un
 
traitement
 spécifique.
 

 
 
 


 


 


 

 
Les
 derniers
 outils
 utilisés
 sont
 les
 centres
 de
 ressources
 biologiques
 où
 l’on
 cryopréserve
 
des
 cellules
 ou
 des
 tumeurs
 particulières.
 Ce
 sont
 en
 fait
 de
 gigantesques
 bibliothèques.
 
Celle
 de
 Caen
 date
 de
 2005.
 


 

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b/Les
 méthodes
 en
 anatomie
 pathologie
 


 
i. La
 macroscopie
 
 Temps
 incontournable
 et
 majeur
 de
 l’examen
 anatomopathologique
 (50%
 du
 
diagnostic)
 
 Nécessite
 une
 connaissance
 parfaite
 de
 l’anatomie
 
 Permet
 de
 sélectionner
 les
 prélèvements
 tissulaires
 
 
 Peut
 s’accompagner
 de
 prélèvements
 bactériologiques
 
 
 Permet
 de
 réaliser
 des
 coupes
 en
 miroir
 avec
 les
 prélèvements
 cryopréservés
 pour
 
la
 tumorothèque
 

 
ii.
 

La
 microscopie
 

Examen
 de
 base
 avant
 toute
 technique
 complémentaire
 
 Nécessite
 une
 procédure
 technique
 avant
 l’obtention
 de
 la
 lame
 :
 
 Fixation
 qui
 permet
 la
 conservation
 morphologique
 
 L’inclusion
 en
 bloc
 de
 paraffine
 
 La
 coloration
 
 Examen
 au
 microscope
 
 

 
La
 fixation
 :
 Fixateur
 le
 plus
 utilisé
 est
 le
 formol
 à
 5%
 (attention
 le
 formol
 est
 cancérigène
 
de
 plus
 il
 tue
 la
 cellule)
 
Les
 autres
 fixateurs
 sont
 :
 Bouin
 (il
 n’est
 plus
 utilisé)
 
AFA
 
alcoolique
 
Les
 substituts
 de
 formol
 type
 :
 excell,
 RCL2,
 etc…
 
 
Pour
 la
 microscopie
 électronique
 on
 utilise
 des
 fixateurs
 spécifiques
 comme
 le
 
glutharaldéhyde
 qui
 est
 lui
 aussi
 toxique.
 
Avant
 fixation
 les
 pièces
 sont
 souvent
 lavées
 et
 rincées.
 

 
Constitution
 du
 bloc
 en
 paraffine
 :
 Déshydratation
 progressive
 par
 alcool
 à
 90°
 et
 alcool
 
absolu
 
Toluène
 
Paraffine
 
Constitution
 de
 la
 coupe
 au
 microtome
 


 

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Coloration
 :
 Déparaffinage
 
Hydratation
 progressive
 par
 alcool
 à
 90°,
 alcool
 absolu
 et
 eau
 
Coloration
 

 
La
 microscopie
 électronique
 permet
 l’étude
 des
 tissus
 à
 l’échelle
 du
 micron
 ou
 de
 
l’angström
 de
 la
 cellule
 ou
 de
 ses
 organites.
 Elle
 est
 de
 moins
 en
 moins
 utilisée
 aujourd’hui,
 
au
 profit
 de
 l’immunohistochimie.
 
Il
 y
 a
 plusieurs
 techniques
 de
 microscopie
 à
 balayage
 (permet
 une
 vue
 en
 relief)
 et
 
microscopie
 à
 transmission
 (vue
 en
 coupe).

Glomérules
 vus
 en
 microscopie
 électronique
 à
 balayage
 

 


 


 

Conclusion
 
L’anatomopathologie
 a
 pour
 objectif
 
 
 d’identifier
 les
 maladies,
 
 
 d’établir
 le
 pronostic
 des
 lésions,
 
 
 de
 reconnaître
 les
 causes
 à
 l’origine
 de
 la
 maladie
 et
 
 
 d’identifier
 les
 mécanismes
 (immunitaires,
 infectieux,
 cancéreux
 )
 
 de
 permettre
 une
 prise
 en
 charge
 thérapeutique
 adapté
 des
 patients
 

 
C’est
 le
 maillon
 incontournable
 de
 la
 prise
 en
 charge
 des
 patients
 à
 l’interface
 entre
 la
 
clinique/
 la
 biologie/
 la
 recherche
 
 

 


 

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