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Biopathologie
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Pr
Françoise
GALATEAU-‐SALLE
Groupe
n°04
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Marine
&
Antoine
L’anatomopathologie
Moyens
et
objectifs
Place
dans
la
médecine
du
XXI
éme
siècle
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Antoine
TABLE
DES
MATIERES
Introduction…………………………………………………..…p.3
A/Historique………………………………………...............p.4
B/Définition……………………………………….…………….p.5
C/Démarche
anatomoclinique…………………p.7
1/Les
outils
a/Les
procédures
i.
La
cytologie………………………………………..p.8
ii.
La
biopsie…………………………………………..p.10
iii.
L’examen
extemporané……………………..p.11
iv.
La
pièce
opératoire…………………………...p.11
v.
L’autopsie………………………………………....p.12
vi.
L’immunohistochimie………………………..p.13
vii.
La
biologie
moléculaire……………………...p.14
b/Les
méthodes
i.
La
macroscopie…………………………………..p.16
ii.
La
microscopie
optique
……………………...p.16
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Introduction
Un
anatomopathologiste
n’est
pas
un
biologiste
mais
bel
et
bien
un
médecin
:
le
diagnostic
repose
sur
l’histoire
clinique
d’un
patient.
Il
est
par
exemple
important
pour
l’anatomopathomogiste
de
savoir
si
le
patient
a
fait
une
chute
auquel
cas
la
lésion
sur
le
crâne
visible
ici
ne
serait
pas
inquiétante.
La
médecine
légale,
quant
à
elle,
est
une
branche
de
l’anatomopathologie
à
la
différence
qu’elle
ne
cherche
pas
expliquer
la
cause
de
la
maladie
mais
la
cause
du
décès.
Petit
rappel
sur
deux
initiateurs
majeurs
de
l’AP
(anatomopathologie):
Bichat
(né
en
1771)
à
écrit
un
traité
des
membranes
:
«
il
faut
voir
avant
de
réfléchir
saisir
les
apparences
avant
de
pénétrer
les
causes,
nos
idées
sont
vagues
sur
tout
objet
extérieur
si
elles
ne
sont
pas
pour
nous
autant
d’images
».
Il
faut
rattacher
ce
que
l’on
voit
aux
symptômes
et
à
la
cause
de
la
maladie.
«
La
vie
est
la
somme
totales
des
fonctions
qui
résistent
à
la
mort
».
Laennec
(né
en
1781)
à
commencé
à
enseigner
l’AP
et
à
inventé
le
stéthoscope
alors
qu’il
était
chef
de
clinique
à
Necker,
lui
permettant
de
découvrir
la
séméiologie
thoracique.
Il
décrète
que
l’observation
AP
doit
être
reliée
à
l’histoire
clinique
du
patient.
Ainsi,
une
même
lésion
cutané
peut-‐être
diagnostiquée
bénigne
ou
maligne
selon
qu’elle
se
trouve
chez
un
enfant
ou
un
adulte.
Du
contexte
découle
le
diagnostic
:
il
ne
faut
donc
jamais
perdre
de
vue
la
lésion.
«
La
méthode
AP
est
la
seule
base
de
connaissances
positives,
on
ne
doit
jamais
la
perdre
de
vue
sous
peine
de
poursuivre
des
chimères
».
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A/Historique
Les
égyptiens
pratiquaient
déjà
l’autopsie
(Papyrus
d’Eber).
Les
grecs,
selon
le
dogme
de
l’Ecole
d’Hippocrate
(460-‐377),
basent
le
diagnostic
de
la
maladie
sur
la
théorie
des
humeurs.
Les
perses
pratiquent
les
dissections
anatomiques
sur
les
cadavres
des
champs
de
bataille,
notamment
sous
l’impulsion
d’Avicenne
(980-‐1037).
Claude
Bernard
est
le
véritable
responsable
de
l’avènement
de
l’anatomopathologie
moderne
(1813-‐1878).
Hermann
Boerhave
(1668-‐1738)
autopsie
des
médecins
décédés
pour
découvrir
la
cause
de
la
maladie.
Giovanni-‐Batista
Morgagni
(1682-‐1771)
de
l’école
de
Padoue
met
en
évidence
la
relation
de
cause
à
effet
entre
les
lésions
constatées
chez
le
cadavre
et
la
séméiologie
clinique.
Xavier
Bichat
(1771-‐1802)
chirurgien
de
l’Hôtel
Dieu
reconnaît
pour
la
première
fois
la
notion
de
tissu
et
développe
les
méthodes
anatomocliniques.
Virchow
(1821-‐1902)
:
développe
la
théorie
cellulaire
initiée
par
Schwann
en
1839,
créant
ainsi
l’histologie
(l’étude
des
tissus
biologiques).
Watson
et
Crick
:
découvrent
la
structure
de
l’ADN
en
1953.
Taylor
(1880)
:
principe
de
l’analyse
immunohistochimique.
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B/Définition
L’anatomopathologie
c’est
l’étude
(logos)
de
la
souffrance
(pathos)
des
tissus.
La
démarche
anatomopathologique
s’appuie
sur
une
séméiologie
diagnostique
(c’est
l’histoire
clinique)
et
repose
sur
un
raisonnement
analogique
(comparaison
de
tissus
et
de
cellules
normales
et
pathologiques).
L’étude
de
la
lésion
se
définit
comme
une
altération
morphologique
(forme-‐
structure-‐architecture)
secondaire
à
un
processus
(c’est
l’étiologie
=
l’étude
des
causes).
Une
fois
l’étiologie
déterminée,
le
clinicien
peut
entrer
en
action.
Avec
la
naissance
de
la
génétique
et
de
la
biologie
moléculaire,
l’AP
devient
aussi
une
discipline
à
visée
diagnostique
et
thérapeutique.
On
peut
donc
l’envisager
comme
la
description
de
lésions
élémentaires
qui
sont
cause
de
maladies
représentant
des
processus
inflammatoires,
dégénératifs,
néoplasiques
ou
circulatoires.
Ils
peuvent
être
héréditaires,
congénitaux
ou
causés
par
un
agent
perturbateur
qui
va
induire
une
réaction
de
l’hôte.
Cet
ensemble
agent
nuisible
+
réaction
hôte
conduit
à
la
maladie/pathologie
dont
on
expliquera
les
causes
par
une
étiologie
et
un
mécanisme.
Une
fois
les
manifestations
(cérébrales,
cutanées,
etc.)
établies
grâce
à
l’étude
de
certains
marqueurs
biologiques,
une
synthèse
va
permettre
à
l’anatomopathologiste
de
:
déterminer
le
diagnostic
lésionnel
le
diagnostic
étiologique
évaluer
le
pronostic
de
la
lésion
(locale,
régionale,
systémique)
envisager
l’évolution
de
celle-‐ci,
posant
ainsi
les
bases
du
traitement
(médical,
chirurgical,
radio
ou
chimiothérapie).
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Agent
nuisible
+
réaction
hote
=
maladie
inflammatoire
dégénérative
néoplasique
pathologie
causes
:
étiologie
mécanisme
manifestations
évolution
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C/Démarche
anatomoclinique
Démarche
diagnostique,
c’est
ce
qui
fait
de
l’AP
une
discipline
médicale.
Comme
la
démarche
clinique,
elle
repose
sur
:
Les
renseignements
cliniques
auprès
du
patient
L’étude
des
altérations
macroscopiques
L’étude
des
altérations
histologiques
1/Les
outils
a/Les
procédures
i.
La
cytologie
(structures
des
cellules)
ii.
La
biopsie
(exérèse
chirurgicale)
iii.
L’examen
extemporané
iv.
La
pièce
opératoire
v.
L’autopsie
(Loi
n°94-‐654
du
29
juillet
1994)
vi.
L’immunohistochimie
vii.
La
biologie
moléculaire
b/Les
méthodes
i.
La
macroscopie
ii.
La
microscopie
optique
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a/Les
procédures
i.
La
cytologie
Elle
étudie
les
cellules.
C’est
une
démarche
très
courante
car
peu
agressive
vis-‐à-‐vis
du
patient,
peu
cher
donc
rentables,
mais
présentant
des
limites.
Par
frottis*
(cervicaux,
vaginaux)
à
la
recherche
de
lésions
précancéreuses
(dues
au
papillomavirus
par
exemple)
Par
raclage*,
brossage*,
écouvillonnage*,
aspirations.
Ces
méthodes
permettent
de
recueillir
les
cellules
qui
desquament
(sachant
que
les
cellules
néoplasiques
commencent
à
desquamer
un
an
avant
de
pouvoir
détecter
un
cancer,
d’où
l’intérêt
stratégique
du
dépistage.)
Cytologie
d’aspiration
et
lavage
alvéolaire
(injection
de
liquide
dans
un
segment
pathologique
puis
recueil
et
analyse
des
cellules
récupérées).
Par
recueil
d’un
épanchement
(pleural,
ascite)
Par
cytoponction
d’un
organe
plein
(thyroïde,
sein,
ganglion)
Par
apposition
sur
une
lame
d’un
morceau
de
lésion
(c’est
la
«
marque
»
laissée
sur
la
lame
que
l’on
observe,
càd
quelque
cellules
seulement)
*le
principes
de
ces
méthodes
est
quasiment
le
même
(recueillir
des
cellules
par
interaction
mécanique).
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Les
techniques
d’observations
s’étant
considérablement
améliorées,
on
utilise
parfois
le
scanner
qui
permet
d’étudier
des
lésions
de
moins
de
0.5mm
de
diamètre.
L’association
«
radpath
»
est
aussi
de
plus
en
plus
courantes
(ponctions
radioguidées
nécessitant
une
précision
extrême,
type
pancréatique
ou
pleurale
par
exemple).
NB
:
inutile
de
prélever
si
c’est
pour
gâcher
la
marchandise
:
dès
qu’il
est
retiré
de
l’organisme,
la
situation
d’ischémie
(arrêt
de
l’irrigation
sanguine)
conduit
au
phénomène
d’autolyse
du
tissu
(cytolyse
quand
on
parle
des
cellules).
Il
est
donc
impératif
de
le
faire
parvenir
rapidement
au
labo.
Si
le
délai
risque
d’être
trop
long
(une
conservation
en
milieu
froid
est
viable
24h
environ),
il
est
nécessaire
de
le
fixer.
Une
fois
fixées,
les
cellules
sont
colorées
au
papanicolaou
(coloration
différentielle
acide/base).
En
pratique
:
pour
former
une
lame
microscopique,
on
appose
le
prélèvement
sur
une
lame
et
on
l’étale
avec
le
bord
d’une
seconde
sans
trop
l’écraser.
Dans
le
cas
d’un
liquide,
on
utilise
une
cytocentrifugeuse.
On
recueil
alors
le
culot
de
centrifugation
que
l’on
peut
étaler
ou
fixer
dans
de
la
paraffine.
Des
coupes
ultrafines
sont
réalisées
pour
permettre
l’observation
microscopique.
Les
hématies
et
les
leucocytes,
communs
à
tous
les
tissus,
servent
d’étalons
en
microscopie.
Ils
permettent
d’évaluer
la
taille
des
éléments
les
uns
par
rapport
aux
autres
et
donc
d’observer
un
élément
d’une
grandeur
éventuellement
anormale.
Un
prélèvement
qui
ne
contient
pas
assez
de
cellules
est
dit
non
diagnostic
ou
non
significatif
:
il
est
nécessaire
d’en
refaire
un
pour
déterminer
s’il
y
a
réellement
une
anomalie.
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Les
prélèvements
tissulaires
ii.
La
biopsie
C’est
le
prélèvement
d’un
fragment
de
tissu
sur
un
être
vivant
qui
va
permettre
de
différencier
des
maladies
inflammatoires,
de
porter
un
diagnostic
de
tumeur
(et
de
pathologies
dégénératives)
ou
de
montrer
l’existence
de
troubles
circulatoires.
La
valeur
de
la
biopsie
repose
sur:
Taille
Le
nombre
Le
choix
de
la
lésion
biopsiée
La
bonne
préservation
du
tissu
Le
repérage
topographique
(par
celui
qui
va
prélever)
Biopsie
de
muqueuse
colique
NB
:
un
prélèvement
dans
une
zone
hémorragique
ou
nécrosée
est
à
exclure
puisque
ininterprétable
(prélèvement
non
significatif).
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Pour
permettre
un
bon
diagnostic
AP,
il
est
nécessaire
de
bien
situer
la
zone
prélevée
et
séparer
les
différents
échantillons
afin
de
ne
pas
créer
de
confusion,
surtout
en
cas
de
métaplasie
(transformation
d'un
tissu
cellulaire
différencié
en
un
autre
tissu
cellulaire
différencié).
iii.
Examen
extemporané
Le
chirurgien
découvre
lors
de
l’intervention
une
lésion
suspecte.
Pour
savoir
s’il
doit
l’enlever
ou
non
il
pratique
un
examen
immédiat.
Pour
cela
on
utilise
:
Des
coupes
à
congélation
réalisées
sur
du
matériel
frais
(non
fixé)
dans
un
cryostat
à
–20°(il
s’agit
en
fait
d’un
microtome
permettant
de
garder
une
température
de
-‐20°)(un
microtome
est
une
machine
d’analyse
cellulaire).
Les
coupes
sont
colorées
et
examinées
au
microscope
en
moins
de
20mn
contre
24h
pour
un
examen
en
temps
normal.
iv. La
pièce
opératoire
L’étude
de
la
pièce
opératoire
consiste
à
établir
le
bilan
des
lésions
(nombre,
siège,
aspect,
extension,
effets
thérapeutiques).
Prise
en
charge
macroscopique
des
pièces
chirurgicales
Renseignements
cliniques
indispensables
:
Données
de
l’imagerie
(T,
lésions
d’obstruction,
ganglions
sous-‐pleuraux)
Chimiothérapie
néoadajuvante
(prétraitement
administré
afin
de
réduire
la
taille
d'une
tumeur
cancéreuse
avant
une
intervention
chirurgicale)
Exposition
professionnelle
à
des
aéro-‐contaminants
(prélèvements
ciblés)
Collecte
de
la
pièce
Rapidement
depuis
bloc
(1/2
heure)
Si
différée
pièce
sur
bloc
de
glace
ou
conservée
au
frigidaire
Fixation
Injection
endobronchique
(dans
l’exemple)
de
formaldéhyde
à
4%
sous
pression
contrôlée
Échantillonnage
24
à
48
H
plus
tard
Résultats
en
72
h
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Morceau
de
poumon.
On
peut
voir
une
petite
tumeur
dans
la
bronche
v.
Autopsie
Examen
pratiqué
sur
un
corps
dans
un
but
scientifique
soit
pour
rechercher
la
cause
de
décès
soit
dans
le
cadre
d’un
conseil
génétique
(fœtopathologie).
Demande
faite
par
le
médecin
traitant
ou
la
famille
Faire
une
demande
écrite
S’assurer
de
la
présomption
de
consentement
en
consultant
le
registre
national
des
refus
(code
de
santé
publique
article
L.
671-‐7)
Informer
la
famille
des
prélèvements
(code
de
santé
publique
article
L.
671-‐9)
Faire
contresigner
le
formulaire
par
le
directeur
général
de
l’hôpital
A
différencier
des
autopsies
médicolégales
demandées
par
les
autorités
judiciaires
ou
administratives
et
réalisées
par
des
médecins
légistes.
Cependant,
il
existe
une
dérogation
demandée
au
procureur
qui
s’applique
dans
des
cas
de
suspicion
de
méningite
à
méningocoques
ou
de
maladies
infectieuses
mettant
en
jeu
la
santé
publique.
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vi.
L’immunohistochimie
L’histochimie
est
en
fait
une
réaction
chimique
réalisée
sur
un
tissu
qui
permet
par
exemple
de
retrouver
des
pigments,
des
éléments
métalliques
etc.
…
L’immunohistochimie
quant
à
elle
est
un
outil
qui
permet
de
révéler
la
présence
de
protéines
au
sein
du
tissu
normal
ou
tumoral
à
l’aide
d’une
réaction
Ag/Ac
que
l’on
révèle
par
un
fluorochrome.
On
utilisera
un
microscope
à
fluorescence.
Il
s’agit
alors
d’immunofluorescence.
On
peut
aussi
utiliser
une
enzyme
comme
la
peroxydase
et
l’on
observera
alors
une
coloration
rouge
marron
là
où
la
réaction
a
eu
lieu
Le
succès
de
l’immunohistochimie
dépend
de
la
capacité
de
cette
technique
à
mettre
en
évidence
ces
protéines
(nucléaire,
membranaire,
cytoplasmique).
Aujourd’hui,
entre
60
et
80
Anticorps
sont
utilisés
en
routine
au
CHU
de
Caen
contre
1
en
1980.
fluorochrome
anticorps
antigène
IMPORTANCE
DE
LA
RIGUEUR
TECHNIQUE
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Intérêt
de
l’analyse
immunohistochimique
:
Démarche
clinique
:
Identification
d’une
tumeur
épithéliale
Identification
d’une
tumeur
mésenchymateuse
Identification
d’une
tumeur
vasculaire
Identification
d’une
tumeur
du
système
lymphoïde
Démarche
d’identification
d’une
sécrétion
hormonale
Mammaire
(Ca
15.3,
RE,
RO)
Thyroïdienne
(TG,
TCT)
Prostate
(PSA)
Démarche
de
prise
en
charge
thérapeutique
en
fonction
des
récepteurs
détectés
vii. La
biologie
moléculaire
On
étudie
directement
l’ADN
ou
l’ARN
par
le
biais
d’une
sonde,
qui
nous
permet
de
comprendre
l’expression
d’une
protéine.
On
fait
de
la
biopathologie.
On
passe
du
génome
(ADN)
au
protéome
(protéine).
Parmi
les
techniques
utilisées
on
compte
la
CGH
array
qui
permet
de
détecter
les
translocations.
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&
Antoine
Ex
:
détection
d’un
rhabdomyosarcome
en
détectant
les
translocations
qui
conduisaient
à
la
production
de
protéines
particulières
comme
la
myogénine.
Ceci
permet
d’utiliser
un
traitement
spécifique.
Les
derniers
outils
utilisés
sont
les
centres
de
ressources
biologiques
où
l’on
cryopréserve
des
cellules
ou
des
tumeurs
particulières.
Ce
sont
en
fait
de
gigantesques
bibliothèques.
Celle
de
Caen
date
de
2005.
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Antoine
b/Les
méthodes
en
anatomie
pathologie
i. La
macroscopie
Temps
incontournable
et
majeur
de
l’examen
anatomopathologique
(50%
du
diagnostic)
Nécessite
une
connaissance
parfaite
de
l’anatomie
Permet
de
sélectionner
les
prélèvements
tissulaires
Peut
s’accompagner
de
prélèvements
bactériologiques
Permet
de
réaliser
des
coupes
en
miroir
avec
les
prélèvements
cryopréservés
pour
la
tumorothèque
ii.
La
microscopie
Examen
de
base
avant
toute
technique
complémentaire
Nécessite
une
procédure
technique
avant
l’obtention
de
la
lame
:
Fixation
qui
permet
la
conservation
morphologique
L’inclusion
en
bloc
de
paraffine
La
coloration
Examen
au
microscope
La
fixation
:
Fixateur
le
plus
utilisé
est
le
formol
à
5%
(attention
le
formol
est
cancérigène
de
plus
il
tue
la
cellule)
Les
autres
fixateurs
sont
:
Bouin
(il
n’est
plus
utilisé)
AFA
alcoolique
Les
substituts
de
formol
type
:
excell,
RCL2,
etc…
Pour
la
microscopie
électronique
on
utilise
des
fixateurs
spécifiques
comme
le
glutharaldéhyde
qui
est
lui
aussi
toxique.
Avant
fixation
les
pièces
sont
souvent
lavées
et
rincées.
Constitution
du
bloc
en
paraffine
:
Déshydratation
progressive
par
alcool
à
90°
et
alcool
absolu
Toluène
Paraffine
Constitution
de
la
coupe
au
microtome
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Coloration
:
Déparaffinage
Hydratation
progressive
par
alcool
à
90°,
alcool
absolu
et
eau
Coloration
La
microscopie
électronique
permet
l’étude
des
tissus
à
l’échelle
du
micron
ou
de
l’angström
de
la
cellule
ou
de
ses
organites.
Elle
est
de
moins
en
moins
utilisée
aujourd’hui,
au
profit
de
l’immunohistochimie.
Il
y
a
plusieurs
techniques
de
microscopie
à
balayage
(permet
une
vue
en
relief)
et
microscopie
à
transmission
(vue
en
coupe).
Glomérules
vus
en
microscopie
électronique
à
balayage
Conclusion
L’anatomopathologie
a
pour
objectif
d’identifier
les
maladies,
d’établir
le
pronostic
des
lésions,
de
reconnaître
les
causes
à
l’origine
de
la
maladie
et
d’identifier
les
mécanismes
(immunitaires,
infectieux,
cancéreux
)
de
permettre
une
prise
en
charge
thérapeutique
adapté
des
patients
C’est
le
maillon
incontournable
de
la
prise
en
charge
des
patients
à
l’interface
entre
la
clinique/
la
biologie/
la
recherche
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L’anatomopathologie
Moyens
et
objectifs
Place
dans
la
médecine
du
XXI
éme
siècle
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TABLE
DES
MATIERES
Introduction…………………………………………………..…p.3
A/Historique………………………………………...............p.4
B/Définition……………………………………….…………….p.5
C/Démarche
anatomoclinique…………………p.7
1/Les
outils
a/Les
procédures
i.
La
cytologie………………………………………..p.8
ii.
La
biopsie…………………………………………..p.10
iii.
L’examen
extemporané……………………..p.11
iv.
La
pièce
opératoire…………………………...p.11
v.
L’autopsie………………………………………....p.12
vi.
L’immunohistochimie………………………..p.13
vii.
La
biologie
moléculaire……………………...p.14
b/Les
méthodes
i.
La
macroscopie…………………………………..p.16
ii.
La
microscopie
optique
……………………...p.16
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Introduction
Un
anatomopathologiste
n’est
pas
un
biologiste
mais
bel
et
bien
un
médecin
:
le
diagnostic
repose
sur
l’histoire
clinique
d’un
patient.
Il
est
par
exemple
important
pour
l’anatomopathomogiste
de
savoir
si
le
patient
a
fait
une
chute
auquel
cas
la
lésion
sur
le
crâne
visible
ici
ne
serait
pas
inquiétante.
La
médecine
légale,
quant
à
elle,
est
une
branche
de
l’anatomopathologie
à
la
différence
qu’elle
ne
cherche
pas
expliquer
la
cause
de
la
maladie
mais
la
cause
du
décès.
Petit
rappel
sur
deux
initiateurs
majeurs
de
l’AP
(anatomopathologie):
Bichat
(né
en
1771)
à
écrit
un
traité
des
membranes
:
«
il
faut
voir
avant
de
réfléchir
saisir
les
apparences
avant
de
pénétrer
les
causes,
nos
idées
sont
vagues
sur
tout
objet
extérieur
si
elles
ne
sont
pas
pour
nous
autant
d’images
».
Il
faut
rattacher
ce
que
l’on
voit
aux
symptômes
et
à
la
cause
de
la
maladie.
«
La
vie
est
la
somme
totales
des
fonctions
qui
résistent
à
la
mort
».
Laennec
(né
en
1781)
à
commencé
à
enseigner
l’AP
et
à
inventé
le
stéthoscope
alors
qu’il
était
chef
de
clinique
à
Necker,
lui
permettant
de
découvrir
la
séméiologie
thoracique.
Il
décrète
que
l’observation
AP
doit
être
reliée
à
l’histoire
clinique
du
patient.
Ainsi,
une
même
lésion
cutané
peut-‐être
diagnostiquée
bénigne
ou
maligne
selon
qu’elle
se
trouve
chez
un
enfant
ou
un
adulte.
Du
contexte
découle
le
diagnostic
:
il
ne
faut
donc
jamais
perdre
de
vue
la
lésion.
«
La
méthode
AP
est
la
seule
base
de
connaissances
positives,
on
ne
doit
jamais
la
perdre
de
vue
sous
peine
de
poursuivre
des
chimères
».
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A/Historique
Les
égyptiens
pratiquaient
déjà
l’autopsie
(Papyrus
d’Eber).
Les
grecs,
selon
le
dogme
de
l’Ecole
d’Hippocrate
(460-‐377),
basent
le
diagnostic
de
la
maladie
sur
la
théorie
des
humeurs.
Les
perses
pratiquent
les
dissections
anatomiques
sur
les
cadavres
des
champs
de
bataille,
notamment
sous
l’impulsion
d’Avicenne
(980-‐1037).
Claude
Bernard
est
le
véritable
responsable
de
l’avènement
de
l’anatomopathologie
moderne
(1813-‐1878).
Hermann
Boerhave
(1668-‐1738)
autopsie
des
médecins
décédés
pour
découvrir
la
cause
de
la
maladie.
Giovanni-‐Batista
Morgagni
(1682-‐1771)
de
l’école
de
Padoue
met
en
évidence
la
relation
de
cause
à
effet
entre
les
lésions
constatées
chez
le
cadavre
et
la
séméiologie
clinique.
Xavier
Bichat
(1771-‐1802)
chirurgien
de
l’Hôtel
Dieu
reconnaît
pour
la
première
fois
la
notion
de
tissu
et
développe
les
méthodes
anatomocliniques.
Virchow
(1821-‐1902)
:
développe
la
théorie
cellulaire
initiée
par
Schwann
en
1839,
créant
ainsi
l’histologie
(l’étude
des
tissus
biologiques).
Watson
et
Crick
:
découvrent
la
structure
de
l’ADN
en
1953.
Taylor
(1880)
:
principe
de
l’analyse
immunohistochimique.
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&
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B/Définition
L’anatomopathologie
c’est
l’étude
(logos)
de
la
souffrance
(pathos)
des
tissus.
La
démarche
anatomopathologique
s’appuie
sur
une
séméiologie
diagnostique
(c’est
l’histoire
clinique)
et
repose
sur
un
raisonnement
analogique
(comparaison
de
tissus
et
de
cellules
normales
et
pathologiques).
L’étude
de
la
lésion
se
définit
comme
une
altération
morphologique
(forme-‐
structure-‐architecture)
secondaire
à
un
processus
(c’est
l’étiologie
=
l’étude
des
causes).
Une
fois
l’étiologie
déterminée,
le
clinicien
peut
entrer
en
action.
Avec
la
naissance
de
la
génétique
et
de
la
biologie
moléculaire,
l’AP
devient
aussi
une
discipline
à
visée
diagnostique
et
thérapeutique.
On
peut
donc
l’envisager
comme
la
description
de
lésions
élémentaires
qui
sont
cause
de
maladies
représentant
des
processus
inflammatoires,
dégénératifs,
néoplasiques
ou
circulatoires.
Ils
peuvent
être
héréditaires,
congénitaux
ou
causés
par
un
agent
perturbateur
qui
va
induire
une
réaction
de
l’hôte.
Cet
ensemble
agent
nuisible
+
réaction
hôte
conduit
à
la
maladie/pathologie
dont
on
expliquera
les
causes
par
une
étiologie
et
un
mécanisme.
Une
fois
les
manifestations
(cérébrales,
cutanées,
etc.)
établies
grâce
à
l’étude
de
certains
marqueurs
biologiques,
une
synthèse
va
permettre
à
l’anatomopathologiste
de
:
déterminer
le
diagnostic
lésionnel
le
diagnostic
étiologique
évaluer
le
pronostic
de
la
lésion
(locale,
régionale,
systémique)
envisager
l’évolution
de
celle-‐ci,
posant
ainsi
les
bases
du
traitement
(médical,
chirurgical,
radio
ou
chimiothérapie).
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Agent
nuisible
+
réaction
hote
=
maladie
inflammatoire
dégénérative
néoplasique
pathologie
causes
:
étiologie
mécanisme
manifestations
évolution
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C/Démarche
anatomoclinique
Démarche
diagnostique,
c’est
ce
qui
fait
de
l’AP
une
discipline
médicale.
Comme
la
démarche
clinique,
elle
repose
sur
:
Les
renseignements
cliniques
auprès
du
patient
L’étude
des
altérations
macroscopiques
L’étude
des
altérations
histologiques
1/Les
outils
a/Les
procédures
i.
La
cytologie
(structures
des
cellules)
ii.
La
biopsie
(exérèse
chirurgicale)
iii.
L’examen
extemporané
iv.
La
pièce
opératoire
v.
L’autopsie
(Loi
n°94-‐654
du
29
juillet
1994)
vi.
L’immunohistochimie
vii.
La
biologie
moléculaire
b/Les
méthodes
i.
La
macroscopie
ii.
La
microscopie
optique
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a/Les
procédures
i.
La
cytologie
Elle
étudie
les
cellules.
C’est
une
démarche
très
courante
car
peu
agressive
vis-‐à-‐vis
du
patient,
peu
cher
donc
rentables,
mais
présentant
des
limites.
Par
frottis*
(cervicaux,
vaginaux)
à
la
recherche
de
lésions
précancéreuses
(dues
au
papillomavirus
par
exemple)
Par
raclage*,
brossage*,
écouvillonnage*,
aspirations.
Ces
méthodes
permettent
de
recueillir
les
cellules
qui
desquament
(sachant
que
les
cellules
néoplasiques
commencent
à
desquamer
un
an
avant
de
pouvoir
détecter
un
cancer,
d’où
l’intérêt
stratégique
du
dépistage.)
Cytologie
d’aspiration
et
lavage
alvéolaire
(injection
de
liquide
dans
un
segment
pathologique
puis
recueil
et
analyse
des
cellules
récupérées).
Par
recueil
d’un
épanchement
(pleural,
ascite)
Par
cytoponction
d’un
organe
plein
(thyroïde,
sein,
ganglion)
Par
apposition
sur
une
lame
d’un
morceau
de
lésion
(c’est
la
«
marque
»
laissée
sur
la
lame
que
l’on
observe,
càd
quelque
cellules
seulement)
*le
principes
de
ces
méthodes
est
quasiment
le
même
(recueillir
des
cellules
par
interaction
mécanique).
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Les
techniques
d’observations
s’étant
considérablement
améliorées,
on
utilise
parfois
le
scanner
qui
permet
d’étudier
des
lésions
de
moins
de
0.5mm
de
diamètre.
L’association
«
radpath
»
est
aussi
de
plus
en
plus
courantes
(ponctions
radioguidées
nécessitant
une
précision
extrême,
type
pancréatique
ou
pleurale
par
exemple).
NB
:
inutile
de
prélever
si
c’est
pour
gâcher
la
marchandise
:
dès
qu’il
est
retiré
de
l’organisme,
la
situation
d’ischémie
(arrêt
de
l’irrigation
sanguine)
conduit
au
phénomène
d’autolyse
du
tissu
(cytolyse
quand
on
parle
des
cellules).
Il
est
donc
impératif
de
le
faire
parvenir
rapidement
au
labo.
Si
le
délai
risque
d’être
trop
long
(une
conservation
en
milieu
froid
est
viable
24h
environ),
il
est
nécessaire
de
le
fixer.
Une
fois
fixées,
les
cellules
sont
colorées
au
papanicolaou
(coloration
différentielle
acide/base).
En
pratique
:
pour
former
une
lame
microscopique,
on
appose
le
prélèvement
sur
une
lame
et
on
l’étale
avec
le
bord
d’une
seconde
sans
trop
l’écraser.
Dans
le
cas
d’un
liquide,
on
utilise
une
cytocentrifugeuse.
On
recueil
alors
le
culot
de
centrifugation
que
l’on
peut
étaler
ou
fixer
dans
de
la
paraffine.
Des
coupes
ultrafines
sont
réalisées
pour
permettre
l’observation
microscopique.
Les
hématies
et
les
leucocytes,
communs
à
tous
les
tissus,
servent
d’étalons
en
microscopie.
Ils
permettent
d’évaluer
la
taille
des
éléments
les
uns
par
rapport
aux
autres
et
donc
d’observer
un
élément
d’une
grandeur
éventuellement
anormale.
Un
prélèvement
qui
ne
contient
pas
assez
de
cellules
est
dit
non
diagnostic
ou
non
significatif
:
il
est
nécessaire
d’en
refaire
un
pour
déterminer
s’il
y
a
réellement
une
anomalie.
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Les
prélèvements
tissulaires
ii.
La
biopsie
C’est
le
prélèvement
d’un
fragment
de
tissu
sur
un
être
vivant
qui
va
permettre
de
différencier
des
maladies
inflammatoires,
de
porter
un
diagnostic
de
tumeur
(et
de
pathologies
dégénératives)
ou
de
montrer
l’existence
de
troubles
circulatoires.
La
valeur
de
la
biopsie
repose
sur:
Taille
Le
nombre
Le
choix
de
la
lésion
biopsiée
La
bonne
préservation
du
tissu
Le
repérage
topographique
(par
celui
qui
va
prélever)
Biopsie
de
muqueuse
colique
NB
:
un
prélèvement
dans
une
zone
hémorragique
ou
nécrosée
est
à
exclure
puisque
ininterprétable
(prélèvement
non
significatif).
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Pour
permettre
un
bon
diagnostic
AP,
il
est
nécessaire
de
bien
situer
la
zone
prélevée
et
séparer
les
différents
échantillons
afin
de
ne
pas
créer
de
confusion,
surtout
en
cas
de
métaplasie
(transformation
d'un
tissu
cellulaire
différencié
en
un
autre
tissu
cellulaire
différencié).
iii.
Examen
extemporané
Le
chirurgien
découvre
lors
de
l’intervention
une
lésion
suspecte.
Pour
savoir
s’il
doit
l’enlever
ou
non
il
pratique
un
examen
immédiat.
Pour
cela
on
utilise
:
Des
coupes
à
congélation
réalisées
sur
du
matériel
frais
(non
fixé)
dans
un
cryostat
à
–20°(il
s’agit
en
fait
d’un
microtome
permettant
de
garder
une
température
de
-‐20°)(un
microtome
est
une
machine
d’analyse
cellulaire).
Les
coupes
sont
colorées
et
examinées
au
microscope
en
moins
de
20mn
contre
24h
pour
un
examen
en
temps
normal.
iv. La
pièce
opératoire
L’étude
de
la
pièce
opératoire
consiste
à
établir
le
bilan
des
lésions
(nombre,
siège,
aspect,
extension,
effets
thérapeutiques).
Prise
en
charge
macroscopique
des
pièces
chirurgicales
Renseignements
cliniques
indispensables
:
Données
de
l’imagerie
(T,
lésions
d’obstruction,
ganglions
sous-‐pleuraux)
Chimiothérapie
néoadajuvante
(prétraitement
administré
afin
de
réduire
la
taille
d'une
tumeur
cancéreuse
avant
une
intervention
chirurgicale)
Exposition
professionnelle
à
des
aéro-‐contaminants
(prélèvements
ciblés)
Collecte
de
la
pièce
Rapidement
depuis
bloc
(1/2
heure)
Si
différée
pièce
sur
bloc
de
glace
ou
conservée
au
frigidaire
Fixation
Injection
endobronchique
(dans
l’exemple)
de
formaldéhyde
à
4%
sous
pression
contrôlée
Échantillonnage
24
à
48
H
plus
tard
Résultats
en
72
h
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Caen
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Biopathologie
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Pr
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Marine
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Antoine
Morceau
de
poumon.
On
peut
voir
une
petite
tumeur
dans
la
bronche
v.
Autopsie
Examen
pratiqué
sur
un
corps
dans
un
but
scientifique
soit
pour
rechercher
la
cause
de
décès
soit
dans
le
cadre
d’un
conseil
génétique
(fœtopathologie).
Demande
faite
par
le
médecin
traitant
ou
la
famille
Faire
une
demande
écrite
S’assurer
de
la
présomption
de
consentement
en
consultant
le
registre
national
des
refus
(code
de
santé
publique
article
L.
671-‐7)
Informer
la
famille
des
prélèvements
(code
de
santé
publique
article
L.
671-‐9)
Faire
contresigner
le
formulaire
par
le
directeur
général
de
l’hôpital
A
différencier
des
autopsies
médicolégales
demandées
par
les
autorités
judiciaires
ou
administratives
et
réalisées
par
des
médecins
légistes.
Cependant,
il
existe
une
dérogation
demandée
au
procureur
qui
s’applique
dans
des
cas
de
suspicion
de
méningite
à
méningocoques
ou
de
maladies
infectieuses
mettant
en
jeu
la
santé
publique.
CHU
Caen
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Pr
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vi.
L’immunohistochimie
L’histochimie
est
en
fait
une
réaction
chimique
réalisée
sur
un
tissu
qui
permet
par
exemple
de
retrouver
des
pigments,
des
éléments
métalliques
etc.
…
L’immunohistochimie
quant
à
elle
est
un
outil
qui
permet
de
révéler
la
présence
de
protéines
au
sein
du
tissu
normal
ou
tumoral
à
l’aide
d’une
réaction
Ag/Ac
que
l’on
révèle
par
un
fluorochrome.
On
utilisera
un
microscope
à
fluorescence.
Il
s’agit
alors
d’immunofluorescence.
On
peut
aussi
utiliser
une
enzyme
comme
la
peroxydase
et
l’on
observera
alors
une
coloration
rouge
marron
là
où
la
réaction
a
eu
lieu
Le
succès
de
l’immunohistochimie
dépend
de
la
capacité
de
cette
technique
à
mettre
en
évidence
ces
protéines
(nucléaire,
membranaire,
cytoplasmique).
Aujourd’hui,
entre
60
et
80
Anticorps
sont
utilisés
en
routine
au
CHU
de
Caen
contre
1
en
1980.
fluorochrome
anticorps
antigène
IMPORTANCE
DE
LA
RIGUEUR
TECHNIQUE
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Intérêt
de
l’analyse
immunohistochimique
:
Démarche
clinique
:
Identification
d’une
tumeur
épithéliale
Identification
d’une
tumeur
mésenchymateuse
Identification
d’une
tumeur
vasculaire
Identification
d’une
tumeur
du
système
lymphoïde
Démarche
d’identification
d’une
sécrétion
hormonale
Mammaire
(Ca
15.3,
RE,
RO)
Thyroïdienne
(TG,
TCT)
Prostate
(PSA)
Démarche
de
prise
en
charge
thérapeutique
en
fonction
des
récepteurs
détectés
vii. La
biologie
moléculaire
On
étudie
directement
l’ADN
ou
l’ARN
par
le
biais
d’une
sonde,
qui
nous
permet
de
comprendre
l’expression
d’une
protéine.
On
fait
de
la
biopathologie.
On
passe
du
génome
(ADN)
au
protéome
(protéine).
Parmi
les
techniques
utilisées
on
compte
la
CGH
array
qui
permet
de
détecter
les
translocations.
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Ex
:
détection
d’un
rhabdomyosarcome
en
détectant
les
translocations
qui
conduisaient
à
la
production
de
protéines
particulières
comme
la
myogénine.
Ceci
permet
d’utiliser
un
traitement
spécifique.
Les
derniers
outils
utilisés
sont
les
centres
de
ressources
biologiques
où
l’on
cryopréserve
des
cellules
ou
des
tumeurs
particulières.
Ce
sont
en
fait
de
gigantesques
bibliothèques.
Celle
de
Caen
date
de
2005.
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b/Les
méthodes
en
anatomie
pathologie
i. La
macroscopie
Temps
incontournable
et
majeur
de
l’examen
anatomopathologique
(50%
du
diagnostic)
Nécessite
une
connaissance
parfaite
de
l’anatomie
Permet
de
sélectionner
les
prélèvements
tissulaires
Peut
s’accompagner
de
prélèvements
bactériologiques
Permet
de
réaliser
des
coupes
en
miroir
avec
les
prélèvements
cryopréservés
pour
la
tumorothèque
ii.
La
microscopie
Examen
de
base
avant
toute
technique
complémentaire
Nécessite
une
procédure
technique
avant
l’obtention
de
la
lame
:
Fixation
qui
permet
la
conservation
morphologique
L’inclusion
en
bloc
de
paraffine
La
coloration
Examen
au
microscope
La
fixation
:
Fixateur
le
plus
utilisé
est
le
formol
à
5%
(attention
le
formol
est
cancérigène
de
plus
il
tue
la
cellule)
Les
autres
fixateurs
sont
:
Bouin
(il
n’est
plus
utilisé)
AFA
alcoolique
Les
substituts
de
formol
type
:
excell,
RCL2,
etc…
Pour
la
microscopie
électronique
on
utilise
des
fixateurs
spécifiques
comme
le
glutharaldéhyde
qui
est
lui
aussi
toxique.
Avant
fixation
les
pièces
sont
souvent
lavées
et
rincées.
Constitution
du
bloc
en
paraffine
:
Déshydratation
progressive
par
alcool
à
90°
et
alcool
absolu
Toluène
Paraffine
Constitution
de
la
coupe
au
microtome
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Coloration
:
Déparaffinage
Hydratation
progressive
par
alcool
à
90°,
alcool
absolu
et
eau
Coloration
La
microscopie
électronique
permet
l’étude
des
tissus
à
l’échelle
du
micron
ou
de
l’angström
de
la
cellule
ou
de
ses
organites.
Elle
est
de
moins
en
moins
utilisée
aujourd’hui,
au
profit
de
l’immunohistochimie.
Il
y
a
plusieurs
techniques
de
microscopie
à
balayage
(permet
une
vue
en
relief)
et
microscopie
à
transmission
(vue
en
coupe).
Glomérules
vus
en
microscopie
électronique
à
balayage
Conclusion
L’anatomopathologie
a
pour
objectif
d’identifier
les
maladies,
d’établir
le
pronostic
des
lésions,
de
reconnaître
les
causes
à
l’origine
de
la
maladie
et
d’identifier
les
mécanismes
(immunitaires,
infectieux,
cancéreux
)
de
permettre
une
prise
en
charge
thérapeutique
adapté
des
patients
C’est
le
maillon
incontournable
de
la
prise
en
charge
des
patients
à
l’interface
entre
la
clinique/
la
biologie/
la
recherche
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